CHO细胞(Chinese Hamster Ovary cells，中国仓鼠卵巢细胞)是一种来源于中国仓鼠卵巢细胞的实验室培养细胞系。中国仓鼠于1948年被带到美国，1957年，T.Puck从波士顿癌症研究基金会的实验室获得了一只中国仓鼠，在那里他用它获得了原始的CHO细胞系。从那时起，人们发现CHO细胞在许多研究中都很有用。
在60多年的CHO细胞研究历史中，从原始细胞系衍生出多种具有不同属性的不同细胞系。常见的CHO衍生物是CHO-K1。它于1957年诞生，是早期CHO细胞的亚克隆，未改造过，属于野生型细胞。但1968年的突变分析表明，CHO-K1细胞缺乏甘氨酸生物合成的基因，而且它比原始的CHO细胞具有更少的DNA。
CHO细胞优点
中国仓鼠卵巢（CHO）细胞是生产蛋白类药物的首选宿主细胞，因为与其他系统相比，CHO细胞具有以下优点：
可进行许多翻译后修饰以获得生物仿制药，几乎与人类相同的质量产品，这些产品显示出卓越的生物相容性和药物活性；
作为贴壁和悬浮培养生长良好，高生产率，是大规模培养和GMP程序的理想选择；
许多经过充分验证的遗传工具，可用于优化 CHO 细胞。从基因引入到敲除、敲低和翻译后沉默；
获批产品数量惊人（用于约 50 种生物治疗药物生产，这些药物已在欧盟和美国获得批准）；
适用于无蛋白、无动物生产、无血清培养条件，并具有更好的稳定性和安全性。
CHO细胞缺点
01
CHO细胞遗传不稳定性引起的表达不稳定：通常，中国仓鼠体细胞的染色体为11对22条，而CHO细胞的染色体则发生了大面积不稳定重排重组现象，不同细胞系染色体的数目也不恒定；
02
外源基因随机整合引起的表达不稳定：传统方法主要是通过表达质粒转染后，利用压力筛选从而获得目的蛋白质表达细胞株。因此，外源基因都是通过随机整合方式，整合到CHO基因组内。由于整合位点的不确定性，可能在细胞培养后期引起表达不稳定；
03
糖基化模式：CHO细胞缺乏在人类细胞中发现的某些糖基转移酶，因此它们不能表达所有的人类蛋白糖型，需要工艺条件的优化而改变：已知细胞培养基中的某些成分对糖基化有特定的影响，例如，特定糖基转移酶功能所必需的微量元素；优化生物反应器参数，如pH值和DO，也可以有效地最大限度地生产所需的糖型。
CHO细胞的应用
01大规模生产治疗性蛋白质
CHO细胞能够在无血清悬浮培养中以高密度生长，并且在延长的发酵周期中维持高水平的蛋白质表达。市场上超过70%的蛋白质药物的首选制造细胞都是CHO细胞。
02作为重组蛋白表达的最常见哺乳动物细胞系
CHO细胞可以在外源表达的蛋白质上掺入复杂的聚糖，如N-连接聚糖。有助于蛋白质的折叠和细胞内运输。重组蛋白表达侧重于最大化每个分子中含有唾液酸的复杂聚糖的数量，CHO细胞糖基化之后，能增加对蛋白水解的抵抗力和延长体内血清半衰期，所以CHO细胞成为最广泛用作重组蛋白的哺乳动物细胞系。
03对重组蛋白进行翻译后修饰
CHO细胞隶属于成纤维细胞，内源性蛋白分泌少，可高效分离和纯化重组蛋白。且CHO细胞具有重组蛋白的高表达和高扩增能力，与真核表达系统中酵母细胞、果蝇细胞S9的翻译后修饰对比，更接近人员细胞蛋白质的修饰。
细胞培养的条件和注意事项
CHO CHO-K1
形态特征 上皮细胞样 上皮细胞样
生长特征 贴壁 贴壁
培养条件 DMEM高糖培养基+10%胎牛血清 F-12K+10%胎牛血清
传代比例 1：3传代（培养面积比） 1：3传代（培养面积比）
传代方式 消化2-3分钟 消化2-3分钟
换液频率 2-3天换液1次 2-3天换液1次
冻存液配方 DMEM高糖+10%FBS+10%DMSO F-12K+10%FBS+10%DMSO
|
