Animal model  2023

肿瘤模型对研究肿瘤生长的生物学过程和抗肿瘤治疗药物的研发非常重要。国内外建立肝癌动物模型的报道有很多，大体可以分为以下三种：

01

╱ 化学诱导模型 ╱

化学诱导肝癌模型是一种常用的实验模型，用于研究肝癌的发病机制、治疗策略和药物筛选。这些模型通过暴露小鼠、大鼠或其他动物给化学物质来诱发肝癌，模拟了人类肝癌的形成过程。以下是一些常见的化学诱导肝癌模型的详细介绍：

1、DEN (Diethylnitrosamine) 模型：DEN是一种有强烈肝毒性的化学物质，通过腹腔注射或静脉注射在小鼠或大鼠上，能够在较短的时间内诱导肝癌。DEN模型已被广泛用于研究肝癌的分子机制、干细胞参与、免疫治疗、药物筛选等领域。

2、AAF (2-Acetylaminofluorene) 模型：AAF是一种化学物质，通过在肝脏中代谢成具有致癌性的代谢产物，诱导肝癌。AAF模型通常通过口服或腹腔注射的方式在小鼠或大鼠身上建立。

3、CCl4 (Carbon Tetrachloride) 模型：CCl4是一种有机溶剂，具有强烈的肝毒性，特别是在长期或高浓度的腹腔注射、口服或呼吸方式下在小鼠、大鼠或其他实验动物上建立肝癌。CCl4模型旨在模拟慢性肝脏疾病的发展，包括肝脂肪变性、肝纤维化和最终的肝癌。

02

╱转基因小鼠模型╱

研究肝癌的转基因小鼠模型对于了解肝癌的发病机制、治疗策略和药物筛选非常重要。以下是一些常见的转基因肝癌小鼠模型的详细介绍：

1、 Albumin-Cre; Sleeping Beauty (SB) Transposon Model：该模型通常使用Albumin-Cre转基因小鼠，该小鼠产生Cre酶，以激活SB转座子系统；SB转座子系统包含基因插入位点，其中包括潜在的致癌基因，这些基因的激活，诱导肝癌的发展。

2、Mdr2 (ABCB4) Knockout Mouse Model：该模型使用Mdr2（ABCB4）基因敲除小鼠，该基因编码一种胆汁运输蛋白。Mdr2基因敲除导致肝胆汁排泄障碍，进而导致肝脏损伤和炎症，最终可能导致肝癌的发展。该模型常用于研究与肝炎、肝纤维化和肝癌相关的发病机制，特别是那些与慢性胆汁淤积有关的情况。

3、Pten Knockout Mouse Model: 该模型敲除Pten基因，这是一个常见的肿瘤抑制基因；Pten基因的敲除可以导致磷脂酶信号通路的异常激活，促使肝癌的发展。该模型被用于研究与Pten基因缺陷相关的肝癌的分子机制，以及可能的靶向治疗方法。

03

╱ 移植瘤模型 ╱

肝癌移植瘤模型主要分为三种：同源肿瘤移植瘤模型（Syngeneic）、人肿瘤细胞株异种移植模型（CDX）、患者来源的肿瘤异种移植模型（PDX）。

同源肿瘤移植瘤模型

Syngeneic

常见的同源移植肝癌模型是使用肝癌细胞系在同种动物体内进行移植的模型。以下是一些常见的同源肝癌模型：

1、 Hepa1-6模型: Hepa1-6细胞系最早起源于C57BL/6小鼠的肝癌细胞系，通过皮下或原位接种C57BL/6小鼠，建立同源移植小鼠模型，以模拟肝癌的生长和治疗效果。这种模型允许研究人员更好地了解肝癌的发展和治疗反应。

2、H22模型：H22细胞系又称Hepatoma-22细胞系。H22来源于BALB/c小鼠肝细胞癌，通过皮下或原位接种BALB/c小鼠，建立同源移植小鼠模型。

CDX模型

Cell Derived Xenograft

CDX模型是指将人源肿瘤细胞株接种于免疫缺陷小鼠构建的肿瘤移植模型。接种部位主要是皮下接种和原位接种。皮下接种荷瘤小鼠模型耗时短、费用低、操作简单，但很少出现转移。原位接种荷瘤小鼠模型肿瘤生长微环境与现实更相似，但操作更复杂且易出现转移。常见的肝癌细胞株CDX模型有Huh7、Hep3B、PLC/PRF/5、MHCC97H、HepG2等。

PDX模型

Patient Derived Xenografts

PDX模型是将患者来源的癌症组织接种于免疫缺陷小鼠体内构成的模型。该模型保留了原发肿瘤的细胞和组织病理学结构，基因组和基因表达谱也很大程度被保留，对临床疗效的可预测性达到80%以上，是目前公认的准确性最高的肿瘤学研究模型。但由于PDX模型构建成本高，患者的癌组织或细胞不易获得，成瘤时间长，成瘤率低等原因，因此PDX模型特别珍贵。南昌乐悠生物科技有限公司已成功构建了16例肝癌PDX，为肿瘤基础研究及抗癌药物临床前药效评价提供了有效工具。

肝癌常用细胞株

Cell lines  2023

1、Huh7：来源于一名患有肝癌的57岁日本男性肝癌组织，表达白蛋白+、a抗胰蛋白酶+、甲胎蛋白（AFP）+、HBV-、对丙型肝炎病毒 (HCV)高度敏感，是研究HCV和肝癌关系的重要模型，也可以用于筛选和开发抗HCV的药物。

2、Hep3B：来源于一名8岁男性黑人肝细胞癌，其包含一个集成的乙型肝炎病毒基因组；表达AFP+、乙型肝炎表面抗原（HBsAg）+、白蛋白+、α2巨球蛋白+、α1抗胰蛋白酶+、转铁蛋白+、α1抗胰凝乳蛋白酶+、结合珠蛋白+、C3激活剂+、纤维蛋白原+、α1酸性糖蛋白+、α2 HS糖蛋白+、β脂蛋白+、视黄醇结合蛋白+等。

3、PLC/PRF/5：来自一位患有原发性HCC的莫桑比克男性患者的标本; AFP+、不产生白蛋白、分泌ad亚型的HBsAg而不产生HBcAg或HBeAg和Dane颗粒, 可维持HAV的繁殖。此细胞系因其产生HBsAg的物理化学和免疫化学特性跟HBV携带者血清中HBsAg相似, 可被用来研究HBV体外病毒及其与原发性肝癌的关联, 抗HBV疫苗所需的HBsAg颗粒的制备及抗病毒药物的制备等方面。

4、MHCC97H：来源于一名我国39岁男性肝癌患者的肝右叶转移病灶的手术切除标本接种于裸鼠肝内建造出人肝癌裸鼠转移模型(LCI-D20)，再裸鼠人肝癌转移模型(LCI-D20)体外传代培养获得高转移特性的人肝癌细胞系。表达HBsAg +、AFP+，成瘤率高且优先转移的靶器官是肺，肺转移率100% 。该细胞株经过再次分离得到的MHCC97H、MHCC97L及HCCLM3 3种细胞株, 依据它们的转移特点, 虽来源同一父系, 但具有异质性, 即具有不同的转移潜能。

5、SNU-398：来源于从一位经过碘油化学栓塞结合阿霉素及丝裂霉素C治疗的，未分化肝癌的韩国男性患者的肝组织。培养细胞呈多核状，会不断在胞质中产生透明小体。细胞携带乙肝病毒DNA，但不表达基因组RNA。表达白蛋白-、转铁蛋白-、AFP-、胰岛素样生长因子 II-。

6、HepG2：来源于一名15岁男性白人肝母细胞瘤。表达胰岛素+、胰岛素样生长因子 II +、AFP+、白蛋白+、α2巨球蛋白+、α1抗胰蛋白酶+、转铁蛋白+、α1抗胰凝乳蛋白酶+、结合珠蛋白+、铜蓝蛋白+、纤溶酶原+、补体（C4）+、C3活化剂+、纤维蛋白原+、α1酸性糖蛋白+、α2 HS糖蛋白+、β脂蛋白+; 视黄醇结合蛋白+等。