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WB凝胶——固定胶VS梯度胶
阅读:223次 | 来源:智者不学生物 | 2024/4/22 10:59:52

01 固定胶

固定胶固定聚丙烯酰胺浓度的胶,如7.5%、10% 的固定胶。

02 梯度胶

梯度胶则是指胶料本身在某一维度(通常为浓度)上形成梯度分布的胶料,其特点是在凝胶中存在梯度浓度的成分。这种梯度胶可以用来分离不同大小或不同电荷的蛋白质,因为在梯度胶中,蛋白质会根据其大小或电荷的不同在凝胶中移动到不同的位置。这样可以实现更精确的蛋白质分离和检测。如4-12%、4-20%的梯度胶。

03 固定胶 VS 梯度胶

3.1 固定胶的优缺点优点:①稳定性好:固定胶通常由聚丙烯酰胺或琼脂糖等材料制成,具有较好的稳定性,不易变形或破裂。 ②价格低廉:固定胶的制备成本较低,适合大规模生产和使用。 ③制备方便,操作简单。 缺点: ① 分辨率较低:固定胶的孔隙结构相对固定,不易调整,导致分辨率较低,不适合分离分子量相近的物质。②分离效果受限:固定胶的孔隙大小固定,不适合分离过大或过小的分子。
3.2 梯度胶的优缺点
优点:①分辨率高:梯度胶可以根据需要调整成分浓度,使得凝胶的孔隙大小呈梯度变化,在蛋白质不能通透的孔径附近对蛋白有浓缩作用 ,从而提高分辨率。 ②分离效果好:梯度胶适合分离分子量相近的物质,能够更好地分离不同大小的分子。③适用范围广:梯度胶适用于各种凝胶电泳技术,如蛋白质电泳、DNA电泳等。缺点:① 制备成本高:梯度胶的制备相对复杂,需要精确控制不同成分的混合比例,成本较高。②使用复杂:梯度胶的使用相对固定胶更为复杂,需要根据实验需要调整梯度浓度,操作较为繁琐。
综上所述,固定胶适合一般的凝胶电泳实验,操作简便,成本低廉;而梯度胶适合需要高分辨率和分离效果的实验,虽然制备和使用较为复杂,但能够提供更好的分离效果。在选择使用哪种胶体材料时,可以根据实验需要和实验条件来进行选择。

 

 
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