辛辛苦苦花钱花精力花时间做的实验，投稿时候发现白做了？常见的医学科研实验之坑有哪些，值得了解一下。

1. 细胞污染 

   这里说的细胞污染，是指细胞系被其他细胞系（特别是HELA）污染的意思，当然，避免实验中支原体、细菌等污染也是实验需要的。

   对于研究肝癌与鼻咽癌的，经常会收到这样的审稿意见而抓狂：

   （1）The Bel-7204 and LO2 cell lines are HeLa-contaminated cell lines of non-pure HCC hepatocyte origin.

   （2）As SMMC-7721 cell line used in your study has been reported to be contaminated.

大概的意思就是做实验的细胞有HELA细胞污染，实验结果是不可信的。

杂志社比较认可的细胞是否污染查询工具： https://www.cellosaurus.org/index.html

对于有污染的细胞，不要用于实验，这个是专家的共识，投稿基本都会被质疑拒稿，基金申请遇到较真的也会被直接否定，实验做了真的可能会白做。可以确定一下没有争议的细胞进行实验即可。

如肝癌的Hep3B与Huh-7细胞，鼻咽癌的C666与HNE3。除了这两个其他基本都被质疑污染了。

2. 非特异性染色 ——Western blot，免疫组化、Tunel等等 

    对于蛋白检测，蛋白的细胞定位、条带大小是固定的，那么对于不在目标蛋白定位，不在目的条带大小的结果，除非能合理解释，否则结果都是不对的，这类问题是实验的问题，结果自然也是不可信的。如果被审稿专家发现，自然是要拒稿的。当然，这个一般可以通过实验优化解决。

    蛋白定位的查询：https://www.uniprot.org/

当然，还有一些非蛋白的染色，如Tunel与Edu染色，这两个染色理论上应该定位在细胞核中，如在细胞质或者细胞外有染色，那可能是非特异性染色，结果也是不可信的。

3. 非全膜带maker的western blot实验

    western blot实验是医学科研实验最常见的实验了，前些年基本对这个实验没有太多要求，有条带用于展示就行，但是因为是最常见的实验，涉及的造假过多，目前70%以上杂志基本都要求提供全膜带maker的western blot实验结果。基于成本考虑，之前大多公司和学生都是按切膜进行的western blot，但目前许多杂志投稿直接要求上传全膜带maker的原始结果在补充材料中，或者审稿的时候要求提供，没有都是直接拒稿的——建议直接上传到补充材料里或提供数据分享链接，减少审稿时间。

4.非特征非规范的显微镜图片

    对于显微镜图片，杂志有基本的要求：1）分辨率300 PPI以上 2）有比例标尺。3）具有代表性

    分辨率不够后期是调整不了的，不过现在大多仪器都满足这个基本要求了。比例尺这个可以后期添加，导图时候最好选择添加。对于具有代表性，首先是能说明实验结论，其次是有代表性的，如对于病理组织切片，肾组织切片需要截图肾小球，海马组织需展示CA1、CA2、CA3区和海马回等各个区域等。

     这些要求如没有满足，都可能在审稿阶段要求添加，如无法满足基本都是直接拒稿的。

5. 未进行全数据备份

    对于一份实验结果，一般需要原始机器检测数据、分析数据。特别是对于测序结果，原始测序数据一般都是要求上传GEO等公共平台的。而对于流式检测，一般要求提供Fcs原文件与门控策略，不能只是散点图。

    这些建议在稿件中直接提供共享链接，审稿基本都要求提供，如无法提供基本都是会拒稿的。

6. 非合理分组

    对于投稿经常被要求增加的分组：

1）上调与下调的分别对照：有些研究者认为都是阴性对照（NC），对于上调与下调都只设置一个阴性对照，而过表达与沉默的载体不同，故其对照也需要单独设置。部分杂志还要求设置空细胞（mock）作为监控。而近些年，对于miRNA的研究，也要求对mimic与inhibitor设置不同的对照。

2）基因沉默或敲除的脱靶验证：对于siRNA与cas9的sgRNA，特别是3分以上杂志，基本都要求进行脱靶的验证，这里一般是需要设置2个靶点的实验进行验证，或者设置回复实验分组。

3）西药阳性药物对照组：对于中药的研究，被要求最多的就是设置梯度的药物浓度（低、中、高浓度）与西药阳性药物对照组。这个也好理解，就是梯度处理后看变化，以及是否有效，也应该有一个公认有效的药物来比较才更靠谱。

对于这些非合理分组，对于编辑要求的增加分组，这实验基本就得全部重做，因为你不可能只去做那个增加的分组，这样是不合理的，数据也很难整合一起比较。

7. 预警与“野鸡”杂志 

    实验做完了，文章已发表了，评职称的时候发现单位不认可？是不是一个头三个大？那就了解一下预警与“野鸡”杂志

    对于预警杂志，这个大家基本应该了解，就是单位或国际的预警期刊，这个一般单位都有发布预警的杂志列表，只要不是列表上的基本都可以被单位认可，警惕些的，可以再关注下国际预警期刊杂志列表

中国科学院文献情报中心发表的《国际期刊预警名单》：https://earlywarning.fenqubiao.com/#/    

    还有一类杂志，大家应该听说过“野鸡”大学，就是非公认的大学，我们称这里杂志为“野鸡”杂志，这类杂志大多是ESCI(Emerging Sources Citation Index)，而非SCI或SCIE，这里杂志大多是在你投稿被拒稿的时候，杂志“好心”给你推荐的杂志，然后正规杂志拒稿这边直接接收。一些网站查询，这个杂志好像也是SCI，经常防不胜防。