商品化的培养基通常以即用型的液体形式或粉剂形式提供。这种培养基通常用于常见的细胞培养实验中,只要按照合适比例加入血清,就成为了完全培养基,就可以应用于细胞的日常培养、细胞增殖、细胞分化、细胞凋亡等实验中。
刚才提到的DMEM、RPMI-1640、MEM等培养基经常是以这种即用型的液体或粉剂形式提供给实验操作者的。
此外,除了这些特定配方的即用型培养基意外,还有定制型的培养基,它是指需要根据特定的配方和比例来自行配制的培养基。这种培养基通常用于一些特殊的细胞培养实验中,如原代细胞培养、干细胞培养等。需要配制的培养基通常包括无血清培养基、低血清培养基、添加了特殊因子的培养基等。这些就需要根据各自的特殊项目而制定针对性的培养条件了。
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常见的1640和DMEM有什么不同?
下面我们以实验室最常见的DMEM和1640为例,来介绍它们之间的不同之处。
DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)是一种最广泛应用的细胞培养基之一,它是由Eagle于1959年开发出来的,后由Dulbecco进行了改良。DMEM主要适用于肝脏、肾脏、肺、心脏等多种类型的哺乳动物细胞系的培养。DMEM中含有较高浓度的葡萄糖(4500mg/L)、氨基酸、维生素和微量元素等营养物质。
此外,DMEM还添加了丙酮酸和乳酸等缓冲剂,能够保持细胞在较宽的pH范围内正常生长。
RPMI-1640(Roswell Park Memorial Institute medium 1640)是一种由Roswell Park纪念研究所开发的细胞培养基,适用于淋巴细胞、骨髓细胞、白血病细胞等多种类型的哺乳动物细胞系的培养。RPMI-1640中含有较低浓度的葡萄糖(2000mg/L)、氨基酸、维生素和微量元素等营养物质。
此外,RPMI-1640还添加了缓冲剂HEPES和碳酸氢盐,能够保持细胞在较窄的pH范围内正常生长。
DMEM和RPMI-1640在营养成分和缓冲剂的配比上有所不同,上述提到它们各自适合培养的细胞种类是经过大量实验验证得到的结果,建议同学们遵照执行即可。
但这也并不代表用错了培养基细胞就一定会死掉,因为DMEM和1640只是在少数成分上做了针对优化,对于大部分细胞株,即使用错,也只是不那么合适而已。
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购买回来的培养基应该如何储存?
培养基是一种含有大量营养物质的复杂溶液,其成分非常容易受到环境的影响而发生变化。因此,在储存和使用培养基时需要注意以下几点:
温度:有条件的情况下,培养基应该储存在4℃冰箱中,避免暴露在高温环境中。此外,在使用前需要将培养基恢复到室温。
光照:培养基应该避免暴露在阳光下或强烈的荧光灯下,以免造成成分变化。
消毒:在使用前需要对培养基进行消毒处理,以避免细菌和病毒污染。
储存时间:一般来说,开封后的培养基应该在一个月内使用完毕,以避免成分变化造成影响。