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7 分的文章是如何应用流式技术的?
阅读:532次 | 来源:来源:生物学霸 | 2019/10/17 8:41:33

临床流式的发展日新月异,有意义的指标越来越多,单纯的做个流式真的已经没办法应对组会、毕业、发高分的目标了。
流式的意义,除了简单的实验外,更重要的是如何在各种领域中的应用!在翻遍文献和参考后,小贝总结了一大波流式在不同热门领域中的应用,同样的工具,看大咖们是怎么玩出花样的?
本期分享的题目是临床流式应用之风湿免疫篇,看看 7 分文章里是如何应用的?
文末还有 PDF 版指南免费下载
什么是风湿免疫病呢?顾名思义,风湿免疫病是免疫系统出了问题导致的:每个人都有免疫力,正常人的免疫力就像健康卫士,每当有细菌、病毒等「外敌」入侵,身体就会释放警报,机体免疫力就会被动员起来,把「外敌」消灭。
然而,有部分人群,这部分正常的免疫力被削弱了,此外又分化出了一些「暴民」——致病性 T 细胞、B 细胞等免疫细胞异常活化、增殖,由此产生了多种炎症介质、细胞因子和自身抗体,这些「暴民」敌我不分,开始攻击人体正常的组织器官,攻击人体的皮肤、关节、脏器,于是风湿免疫疾病发生了——这就是大部分风湿免疫疾病的发病原因。
值得注意的是,早期诊治早期用药,可以使风湿免疫疾病患者的病情在发病的起始阶段得到控制。流式细胞术可直接对免疫系统进行监测,对于风湿免疫病的诊断和治疗都具有重要的指导价值
由于风湿免疫性疾病种类多样,病因复杂,且个体差异较大,不同疾病种类的免疫机制不尽相同,免疫功能检测需要区别病种,根据病情动态监测,在综述「Could Lymphocyte Profiling be Useful to Diagnose Systemic Autoimmune Diseases」中,法国科学家 Guillermo 等人总结了近年来淋巴细胞亚群在风湿免疫性疾病中的变化规律:


图 1:在 pSS、SLE 以及 RA 患者中 B 细胞亚群的异常表达分布


图 2:在 pSS、SLE 以及 RA 患者中 T、NK 细胞亚群的异常表达分布

01原发性干燥综合症(pSS)


原发性干燥综合症(pSS)是一种自身免疫性疾病,主要表现为外分泌腺淋巴细胞浸润及进步的功能障碍,临床表现为口、眼干燥,并可累及肾、肺、神经系统、消化系统等多个系统,引起的全身器官受累。
在过去二十几年的研究中针对 pSS 发展了多种分类标准,然而没有一种方法能够明确对其进行诊断,而淋巴细胞亚群作为自身免疫反应的参与者,也逐渐引起临床的重视和研究,逐渐揭开了其免疫机制的神秘面纱,对 pSS 疾病的诊断和治疗提供重要指导。

表 1:为历年研究中,pSS 患者 T 细胞和 NK 细胞异常表达情况总结


表 2:历年研究中,pSS 患者 B 细胞异常表达情况总结



02风湿性关节炎(RA)
风湿性关节炎 (RA)也是发病率较高的一类慢性自身免疫性疾病,以多发性关节炎、滑膜炎、骨侵蚀等为特征,临床上常以类风湿因子、抗瓜氨酸抗体检测为诊断依据。
然而,血清阴性类风湿性关节炎的诊断却由于改善病情的抗风湿药物(DMARDs)的使用而异常困难,因此需要新的检测手段来辅助临床进行诊疗。
除了自身抗体检查外,淋巴细胞亚群检测也成为了重要的检测指标,由于类固醇和合成或生物 DMARD 药物的使用可以较大程度上影响 T、B、NK 等亚群的分布,因此临床多以初诊患者的淋巴细胞亚群来评估疾病状态,并在用药后通过淋巴细胞亚群的表达变化观察疾病恢复情况并指导治疗。


表 3:为淋巴细胞亚群在早期未治 RA 患者中的异常表达情况

03系统性红斑狼疮(SLE)
系统性红斑狼疮(SLE)是一种多发于青年女性的累及多脏器的自身免疫性炎症性结缔组织病。
早期、轻型和不典型的病例日渐增多,其发病的免疫机制大致为:在遗传因素、环境因素、雌激素水平等各种因素相互作用下,导致 T 淋巴细胞减少、T 抑制细胞功能降低、B 细胞过度增生,产生大量的自身抗体,并与体内相应的自身抗原结合形成相应的免疫复合物,沉积在皮肤、关节、小血管、肾小球等部位。
在补体的参与下,引起急慢性炎症及组织坏死(如狼疮肾炎),或抗体直接与组织细胞抗原作用,引起细胞破坏(如红细胞、淋巴细胞及血小板壁的特异性抗原与相应的自身抗体结合,分别引起溶血性贫血、淋巴细胞减少症和血小板减少症),从而导致机体的多系统损害。
因此许多临床研究关注于淋巴细胞亚群在 SLE 患者中的表达状态。


表 4:为作者总结的异常 B 淋巴细胞在 SLE 患者中的表现


表 5:为异常 T 细胞和 NK 细胞在 SLE 患者中的表达情况
总结:

由此可见淋巴细胞亚群比例失调在自身免疫病的发生发展中起到非常重要的作用,且 T 细胞及其各亚群、B 细胞水平随免疫抑制剂治疗发生变化。检测 自身免疫病患者外周血淋巴细胞亚群,有助于更全面了解患者整体免疫状态及疾病活动情况,从而更好地指导临床治疗,对病情判断和临床治疗和观察是有一定价值的参考指标。此外,自身免疫性疾病往往采用免疫抑制剂或者靶向药物进行治疗,治疗后的免疫检测用以评价疗效以及指导用药有非常重要的价值。

参考文献:

1. Guillermo C.A. Could Lymphocyte Profiling be Useful to Diagnose Systemic Autoimmune Diseases? [J]. Clinic Rev AllergImmunol, DOI 10.1007/s12016-017-8608-5



 

 
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