我叫骨头,是万事屋里新来的菜鸟,这几天真真是不得了的事情。没错,我把细胞房给污染了。
好吧,其实也并不一定怪我……我们实验室的细胞房,除了师姐几乎没人认真做实验。好多师兄,像小林子师兄,都是穿着他的跑鞋进进出出细胞房的。鲁老板一出现在实验室,他就披个白大褂,躲到细胞房装模作样地用细胞房电脑玩扫雷,或者蜘蛛纸牌。还以为我不知道,他眼镜上的绿屏已经深深地粗卖了他。
这次我的细胞被污染了,我感觉他一定有责任!但是,事已至此,细胞反正是就不回来了,那应该要亡羊补牢吧,但要怎么样来清扫细胞房呢?
莫愁:咳咳!你们啊!平时不注意,临死抱佛脚!好了,现在我安排一下细胞房清洁的方案。以后细胞房都要按照这样来进行操作!
首先,我们需要的东西有以下这些:
1)10ml甲醛+5g高锰酸钾(这个是每立方米的用量,细胞房体积自己算哈,比如有10平方米,层高三米的话,就是30立方米,那就要用300ml甲醛,150g高锰酸钾);
2)废报纸,用来堵出/入风口,棉绳;烧杯,脸盆,水,用来甲醛熏蒸,防止爆沸。
3)卫康/卫可消毒液(Virkon S),配置成2%溶液,不管叫什么,这种消毒液是粉红色溶液,7天失效后粉红色变淡。这种消毒液无腐蚀性、无污渍作用、无环境残留问题,毒性超低。但可以对细菌、真菌、病毒有较强抗性效果;
4)70%乙醇,这个要找个喷壶;
5)棉球,要尽量用棉球来进行清洁操作;
6)20g硫酸铜+5mL浓硫酸+1L水,灭菌,这个要放置在二氧化碳培养箱的水盘中。
这些准备好了,就可以开始了。
第一步,用废旧报纸封堵所有出风口,将棉绳埋在透明胶内,便于熏蒸完撕扯:
第二步,按照下图,进行熏蒸,熏蒸时超净台和培养箱都关电源,打开,记住,甲醛倒进去之后,马上跑;
第三步,熏蒸三天后(其实最好一周),快速进入(如果有防毒面具就戴防毒面具),关掉培养箱和超净台,然后扯掉棉绳,让出入风口暴露,打开细胞房风机;
第四步,接下去每两周都要进行清洁工作,首先是清洁培养箱,先将培养箱清空,用有2%的卫可消毒液的棉球擦拭一遍,然后用70%乙醇喷洗;
第五步,水盘清洁,水盘中每两天更换一次灭菌好的硫酸铜溶液(夏天或者梅雨季需要更换为0.02%的叠氮化钠,注意,洗干净再换,也不要过量,别弄得爆炸……),水盘每两周灭菌一次;
第六步,超净台或者生物安全柜,每次使用完后,用2%的卫可消毒液的棉球擦拭一遍,然后用70%乙醇喷洗;
第七步,每周进行移液枪的清洗,知道怎么拆移液枪不?用吉尔森的来演示一下是这样的:
弹簧部件用2%的卫可消毒液的棉签和70%乙醇的棉签轻轻擦拭,注意不要弄丢上面的密封圈。白色的套管,在2%的卫可消毒液中浸泡30分钟,然后转至70%乙醇清洗,最后用灭菌水清洗,擦干;
第八步,丢弃之前使用过的培养基和血清,以免再发生污染;
第九步,每周用2%的卫可消毒液拖地,每天实验结束后,打开紫外灯过夜。
…华丽丽的分割线…
李莫愁博士:一旦出现污染,要怎么样清洁细胞房,大家应该明白了吧。但甲醛熏蒸毕竟是亡羊补牢,要避免污染,还是要在平时注意细胞房的使用,也应该按照4-9步进行常规操作。但是,我知道,你们基本都做不到……好吧,今天还是策到这里吧……
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